كيفية قياس نمو البكتيريا

المحتوى

• مراحل
• طريقة 1 من 3: لاحظ البكتيريا مباشرة
• طريقة 2 من 3: قياس الكتلة الحيوية
• طريقة 3 من 3: المضي قدما بقياس التعكر

في هذه المقالة: مراقبة البكتيريا مباشرةقياس الكتلة الحيويةإجراء القياس العكسي 8 المراجع

هناك عدة طرق لقياس نمو البكتيريا ، وبعضها أكثر صعوبة من غيرها. تستخدم أبسطها عادة وتعطي نتائج دقيقة نسبيا ، شريطة أن تكون صارمة أثناء القياسات. أكثر التقنيات شيوعًا هي مراقبة وحساب البكتيريا وقياس الكتلة الحيوية والكتلة الحيوية الجافة وقياس العكارة. يجب أن يتوفر في مختبر مدرستك المعدات اللازمة لإحدى هذه الطرق على الأقل.

مراحل

طريقة 1 من 3: لاحظ البكتيريا مباشرة

1. 
   

   
   تحضير المعدات. بالإضافة إلى ما يوجد عادة في جميع مختبرات البيولوجيا ، ستحتاج إلى بعض العناصر المحددة. تأكد من أن جميع الأدوات والحاويات في متناول يديك ، بحيث لا تضطر إلى العودة ذهابًا وإيابًا في الخزانة حيث يتم تخزين الجهاز. فكر في ما ستفعله لمعرفة ما ستستخدمه في كل مرحلة. سيكون عليك أيضًا معرفة بعض المصطلحات الأساسية.
   • الحصول على عدادة الكريات. إنها شفرة ذات غرف ترقيم مرتبطة بالمجهر. إنها وسيلة سهلة للغاية لضبط واستخدام. يمكنك العثور على بعض من الموردين المتخصصين في معدات المدارس والمختبرات البحثية. عادة ما يتم توفير دليل المستخدم.
   • خذ طبق بتري. هذه حاوية صغيرة مستديرة ضحلة يمكنك من خلالها مراقبة البكتيريا.
   • يشير مصطلح "الثقافة" إلى الكائنات الحية الدقيقة التي يتم نشرها بشكل مصطنع كجزء من تجربة علمية.
   • "مرق الثقافة" هي الوسيلة التي ستتطور فيها الثقافة.

2. 
   

   
   
   
   استخدم طبق بتري. ضع البكتيريا في الصندوق وراقبها تحت المجهر. يمكنك أيضا وضعه مباشرة على شريحة. ثم حساب عدد الخلايا البكتيرية الموجودة.

3. 
   

   
   تأكد من أن لديك التركيز الصحيح. إذا كان هناك الكثير من البكتيريا ، فسوف تتداخل ولن تتمكن من حسابها بشكل صحيح. إذا كان هذا هو الحال ، فقم بتخفيف الثقافة عن طريق مزجها مع مرق صغير. إذا كان هناك عدد قليل جدًا ، فلن تكون النتيجة كبيرة. يجب عليك بعد ذلك تصفية المرق لزيادة التركيز.

4. 
   

   
   عد البكتيريا. الخطوة الأخيرة هي ببساطة الاعتماد. انظر إلى غرف العد تحت المجهر ولاحظ عدد الخلايا التي تراها. قارن النتيجة مع تجارب أخرى مماثلة.

طريقة 2 من 3: قياس الكتلة الحيوية

1. 
   

   
   
   
   تأكد من أن لديك الأدوات اللازمة. هذه الطريقة بطيئة في التنفيذ وتتضمن استخدام معدات باهظة الثمن. إذا كنت لا تغسله ، استخدم تقنية أخرى. من ناحية أخرى ، إذا كان لدى المختبر الذي تستخدمه الأدوات الصحيحة ، فإن قياس الكتلة الحيوية والكتلة الجافة مثالي لأنه يعطي نتائج دقيقة. تحتاج:
   • الفرن الحراري القسري ،
   • عموم الألومنيوم وزنها ،
   • عدة قوارير Erlenmeyer ،
   • الطرد المركزي أو نظام الترشيح المختبر.

2. 
   

   
   تحقق من أن المحصول في قارورة Erlenmeyer. إذا لم يكن الأمر كذلك ، فقم بسكبه. في هذه المرحلة من التجربة ، لا تزال البكتيريا في حساء الثقافة. سيتم فصلهم في وقت لاحق.

3. 
   

   
   تجفيف عموم وزنها. لهذا ، ضعه في الفرن. يمكنك أيضًا استخدام مرشح غشاء خلات السليلوز قطره 47 مم مع مسام 0.45 ميكرون. أيًا كانت الأداة المستخدمة ، قم بقياس كتلتها بدقة حتى يمكن طرحها من النتائج التي تحصل عليها عند وضع المحصول عليها.

4. 
   

   
   المزيج. تحريض lerlenmeyer بحيث الثقافة متجانسة. في الواقع ، بسبب الجاذبية ، تميل الخلايا بشكل طبيعي إلى السقوط في قاع الحاوية. لذلك عليك أن تهز قليلاً والتي يتم توزيعها بطريقة موحدة وأن عينتك أكثر تمثيلا.

5. 
   

   
   أجهزة الطرد المركزي. باستخدام أجهزة الطرد المركزي ، فصل البكتيريا عن مرق الثقافة. يستخدم هذا الجهاز لتحويل الحاوية وثقل الموازنة بسرعة عالية جدًا. مرق التدفقات ، والتي تحافظ على المادة الحية فقط. لمزيد من المعلومات ، ستجد معلومات حول كيفية استخدام جهاز طرد مركزي على الإنترنت.

6. 
   

   
   الحصول على العجين. أسقطه على المقلاة. يمكنك إلقاء حساء الثقافة ، لن تحتاج إليها بعد الآن ، ولكن ابق على lerlenmeyer في متناول اليد.

7. 
   

   
   شطف الطرد المركزي. صب ماء الشطف على مقلاة الوزن بالإضافة إلى الخلايا البكتيرية. النتيجة التي تم الحصول عليها لكل شيء تمنحك الكتلة الحيوية.

8. 
   

   
   العثور على كتلة جافة. لمعرفة الكتلة الحيوية الجافة لعينتك ، ضع مقلاة الوزن في الفرن على درجة حرارة 100 مئوية لمدة تتراوح من 6 إلى 24 ساعة ، وفقًا للتعليمات المرفقة مع جهازك. يجب الحرص على عدم تجاوز درجة الحرارة هذه لتجنب حرق البكتيريا. ثم تزن كل شيء ، ثم اطرح كتلة الدرج.

طريقة 3 من 3: المضي قدما بقياس التعكر

1. 
   

   
   تحضير المعدات الخاصة بك. ستحتاج إلى مصدر ضوئي ومقياس طيفي ، وهو جهاز موجود في معظم مختبرات العلوم. ارﺟﻊ إﻟﻰ دﻟﻴﻞ اﻟﻤﺴﺘﺨﺪم اﻟﻤﺰود ، ﺣﻴﺚ أن آﻞ ﻃﺮاز ﻟﻪ ﺗﺸﻐﻴﻞ ﺧﺎص هذه الطريقة هي واحدة من الأكثر استخدامًا لقياس نمو البكتيريا ، لأنها لا تتطلب سوى أدوات غير مكلفة وسهلة الاستخدام.

2. 
   

   
   جلب الضوء في الثقافة. يستخدم التعكر لتقييم محتوى السائل في الجسيمات ، وهو مبلغ لتحديد ما إذا كان غائمًا إلى حد ما. سيتم إعطاء النتيجة التي ستحصل عليها من هذا القياس في وحدة NTU (أو وحدات التعكر النيفيلومترية). قد يكون من الضروري إجراء معايرة للجهاز من أجل قياس تعكر العينة بدقة.

3. 
   

   
   تدوين الملاحظات. التعكر هو كمية البكتيريا في العينة. سيسمح لك مقياس الطيف الضوئي أيضًا بمعرفة نفاذية المحلول (٪ T) ، التي تتناسب قيمتها عكسًا مع قيمة التعكر. ثم قارن النتائج التي تم الحصول عليها على عينات مختلفة لقياس نمو البكتيريا.